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——顛覆傳統(tǒng)Western blot，開啟“一鍵Westen“時代！
告別電泳！告別轉(zhuǎn)膜！告別成像儀器檢測！告別手動數(shù)據(jù)分析！
您只需簡單的放上樣品、一抗和緩沖液，單擊“開始”，然后離開，三個小時后，您即可回來讀取已經(jīng)分析好的數(shù)據(jù)結(jié)果，Westen變得如此高效簡單！
美國ProteinSimple公司（原Cell Biosciences）研發(fā)出更為簡便的Western檢測方法代替?zhèn)鹘y(tǒng)的Western blot，用于分析蛋白大小和定量檢測。Simon集成Western bolt所需的各項操作，無需使用凝膠、轉(zhuǎn)膜和膠片，完成實現(xiàn)自動化操作。研究人員只需加樣，按下開始按鈕，系統(tǒng)便可自動返回到全面的實驗結(jié)果。
Western blotting堪稱蛋白質(zhì)研究中的經(jīng)典方法。學生物的幾乎無人不曉，即使沒親手做過，也清楚其原理。經(jīng)典果然是經(jīng)典，30年來其操作步驟幾乎沒變過，依然是跑膠-轉(zhuǎn)膜-封閉-孵育-檢測。近兩年，各大公司陸續(xù)推出了Western blotting方面的新儀器，如新型轉(zhuǎn)印系統(tǒng)，確實能省時省力不少，但仍然不能完全克服研究人員在今天面臨的挑戰(zhàn)。Western blotting仍存在重復(fù)性差、實驗耗時長、無法準確定量等問題。
近日，美國proteinsimple公司推出了一種Simple Western™分析，徹底改變了整個Western blot。此分析在一臺名為Simon的儀器上開展，Simon將所有實驗步驟自動化，包括蛋白上樣和分離、免疫印跡、洗滌、檢測以及數(shù)據(jù)的定量分析，讓研究人員從繁重的勞動中解放出來，同時避免了可能影響實驗重復(fù)性的人為因素。
無需凝膠、無需轉(zhuǎn)印，放入您的樣品，按個按鈕，然后就沒事了。幾個小時之后，完全分析好的結(jié)果正等著你呢，一切聽上去是不是有點不可思議？
首先，將樣品與Simple Western樣品緩沖液混合，至終濃度1 μg/μL，還原并變性，然后將制備好的樣品、一抗和二抗、化學發(fā)光底物分配到384孔分析板的指定孔中。之后，將Simple Western分析緩沖液、毛細管和制備好的分析板放入Simon內(nèi)，它自動開展所有分析步驟。
當?shù)鞍籽刂毠軆?nèi)一個堆積和分離基質(zhì)遷移時，它們分離。分離后的蛋白固定到毛細管壁上。之后利用一抗鑒定目標蛋白，用HRP結(jié)合的二抗和化學發(fā)光底物檢測蛋白。系統(tǒng)自動報告檢測蛋白的分子量和信號。每次實驗可同時分析最多12個樣品，結(jié)果可在3-5小時內(nèi)獲得。15-150 kDa的目標蛋白均可檢測。軟件報告每個檢測蛋白的分子量、面積、面積百分比和信噪比。
對于傳統(tǒng)的Western blot而言，結(jié)果的重復(fù)性一直是個挑戰(zhàn)，因為缺乏標準化的操作，且多個操作步驟引入了實驗可變性。而Simple Western分析是完全自動化的，因此結(jié)果的重復(fù)性更好。整體的定量也大大改善了，因為省去了轉(zhuǎn)印步驟，從而避免了蛋白轉(zhuǎn)移的不一致。
有了Simple Western，Western真的簡單了。你可以省下大量時間，干更有意義的工作，同時獲得重復(fù)性更好的半定量Western blot結(jié)果。
 
1、無需繁瑣、混亂的制膠、跑膠過程，減少操作程序，避免污染
2、無需轉(zhuǎn)膜，減少實驗步驟，避免樣品損失，提高結(jié)果的準確率和重復(fù)率
3、系統(tǒng)自動加樣
4、根據(jù)蛋白樣品的分子量大小自動進行分離
5、采用專利技術(shù)進行蛋白質(zhì)捕獲及固定
6、自動進行一抗、二抗孵育
7、自動進行免疫和化學發(fā)光檢測步驟
8、完全無需人工干預(yù)，避免實驗過程中的人為誤差
9、可同時運行12個獨立樣品
10、單個樣品上樣量為~3ug，上樣體積約3ul
11、一次運行時間3-5個小時
12、結(jié)果具有高度重復(fù)性，CV≤10%
14、系統(tǒng)自動完成數(shù)據(jù)采集過程
15、軟件可對結(jié)果自動進行精確的定量分析
16、軟件設(shè)計獨特，用戶可定義樣品，設(shè)置檢驗流程和分析運行數(shù)據(jù)
17、可置于工作臺面上，方便操作
Major academic institutions such as:
· Stanford university
· Harvard Medical School
· University of Texas
· Columbia University
· National Institutes of Health
· National Cancer Institute
Pharma & Biotech:
· Merck
· Genentech
· Novartis
· Abbott
· Astra-Zeneca
· Pfizer |
